移液器的選購(gòu)要點(diǎn)
移液器的選擇,一般注意從以下幾個(gè)方面進(jìn)行考慮:
1.產(chǎn)品性能,即移液器的準(zhǔn)確性和重復(fù)性
對(duì)于絕大多數(shù)用戶而言,購(gòu)買之前檢測(cè)產(chǎn)品性能既有難度又無(wú)必要。因此,主要還是依據(jù)制造廠商提供的技術(shù)數(shù)據(jù)。但在這里還是要說(shuō)明兩點(diǎn):其一,不要輕易相信賣家的口頭承諾,一定要查閱制造商提供的書面材料;其二,在全球移液器市場(chǎng)上影響較大的品牌,如RAININ,EPPENDORF和GILSON等,其提供的技術(shù)數(shù)據(jù)可信度更高。
2.產(chǎn)品的可靠耐用
這一方面,主要取決于移液器所用的材料。對(duì)于外殼,應(yīng)當(dāng)有較高的耐沖擊性、耐腐蝕性和較低的導(dǎo)熱性(如PVDF材質(zhì));對(duì)于活塞,目前市場(chǎng)上主要有不銹鋼、陶瓷和塑料三種材質(zhì)。不銹鋼機(jī)械性能好、壽命長(zhǎng),只是不太適合用于強(qiáng)酸強(qiáng)堿的移液;陶瓷則有很高的耐腐蝕性,但機(jī)械性能較差。當(dāng)然,優(yōu)質(zhì)的材料往往意味著更高的價(jià)格,所以需要綜合考慮購(gòu)買價(jià)格和壽命的因素。
3.產(chǎn)品的人體工程學(xué)設(shè)計(jì)
主要可以考慮以下幾點(diǎn):第一,完成一個(gè)移液循環(huán)拇指的移動(dòng)距離短,意味著舒適度更高;第二,比較相同量程的移液器完成一次排液(一定要按到底)所需的拇指用力,這是影響舒適性的關(guān)鍵,用力越少意味著長(zhǎng)期使用造成手指損傷的風(fēng)險(xiǎn)越??;第三,裝卸吸頭,同樣是越省力越好;第四,移液器的重量適中,過(guò)重會(huì)增加手的負(fù)擔(dān),但過(guò)輕也往往意味著材質(zhì)可能差強(qiáng)人意;第五,其它的輔助設(shè)計(jì),如殼體的磨砂設(shè)計(jì)以及指鉤設(shè)計(jì),有助于進(jìn)一步提高舒適性。
二
移液器的原理和分類
微量加樣器(移液器)最早出現(xiàn)于1956年,由德國(guó)生理化學(xué)研究所的科學(xué)家Schnitger發(fā)明,其后,在1958年德國(guó)Eppendorf公司開(kāi)始生產(chǎn)按鈕式微量加樣器,成為世界上第一家生產(chǎn)微量加樣器的公司。這些微量加樣器的吸液范圍在1—1000~1之間,適用于臨床常規(guī)化學(xué)實(shí)驗(yàn)室使用。微量加樣器發(fā)展到今天,不但加樣更為精確,而且品種也多種多樣,如微量分配器、多通道微量加樣器等,其加樣的物理學(xué)原理有下面兩種:①使用空氣墊(又稱活塞沖程)加樣;②使用無(wú)空氣墊的活塞正移動(dòng)(positivedisplacement)加樣。上述兩種不同原理的微量加樣器有其不同的特定應(yīng)用范圍。
一、空氣墊加樣器
活塞沖程(空氣墊)加樣器可很方便地用于固定或可調(diào)體積液體的加樣,加樣體積的范圍在小于1ul至l0ml之間。加樣器中的空氣墊的作用是將吸于塑料吸頭內(nèi)的液體樣本與加樣器內(nèi)的活塞分隔開(kāi)來(lái),空氣墊通過(guò)加樣器活塞的彈簧樣運(yùn)動(dòng)而移動(dòng),進(jìn)而帶動(dòng)吸頭中的液體,死體積和移液吸頭中高度的增加決定了加樣中這種空氣墊的膨脹程度。因此,活塞移動(dòng)的體積必須比所希望吸取的體積要大約2%~4%,溫度、氣壓和空氣濕度的影響必須通過(guò)對(duì)空氣墊加樣器進(jìn)行結(jié)構(gòu)上的改良而降低,使得在正常情況下不至于影響加樣的準(zhǔn)確度。一次性吸頭是本加樣系統(tǒng)的一個(gè)重要組成部分,其形狀、材料特性及與加樣器的吻合程度均對(duì)加樣的準(zhǔn)確度有很大的影響。
二、活塞正移動(dòng)加樣器
以活塞正移動(dòng)為原理的加樣器和分配器與空氣墊加樣器所受物理因素的影響不同,因此,在空氣墊加樣器難以應(yīng)用的情況下,活塞正移動(dòng)加樣器可以應(yīng)用,如具有高蒸汽壓的、高黏稠度以及密度大于2.0g/cm3的液體;又如在臨床聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)測(cè)定中,為防止氣溶膠的產(chǎn)生,最好使用活塞正移動(dòng)加樣器?;钊苿?dòng)加樣器的吸頭與空氣墊加樣器吸頭有所不同,其內(nèi)含一個(gè)可與加樣器的活塞耦合的活塞,這種吸頭一般由生產(chǎn)活塞正移動(dòng)加樣器的廠家配套生產(chǎn),不能使用通常的吸頭或不同廠家的吸頭。
三、多通道加樣器、電子加樣器和分配器
多通道加樣器、電子加樣器和分配器的原理與上述相同。多通道加樣器通常為8通道或12通道,與8X12=96孔微孔板一致。多通道加樣器的使用不但可減少實(shí)驗(yàn)操作人員的加樣操作次數(shù),而且可提高加樣的精密度。電子加樣器和分配器為半自動(dòng)加樣系統(tǒng),電子加樣器最大的優(yōu)點(diǎn)是其具有很高的加樣重復(fù)性,應(yīng)用范圍廣。
三
移液器使用注意事項(xiàng)
1.設(shè)定移液體積
從大量程調(diào)節(jié)至小量程為正常調(diào)節(jié)方法,逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)刻度即可
從小量程調(diào)節(jié)至大量程時(shí),應(yīng)先調(diào)至超過(guò)設(shè)定體積刻度,再回調(diào)至設(shè)定體積,這樣可以保證移液器的精確度
2.裝配移液槍頭
將移液槍垂直插入吸頭,左右旋轉(zhuǎn)半圈,上緊即可。
用移液器撞擊吸頭的方法是非常不可取的,長(zhǎng)期這樣操作回導(dǎo)致移液器的零件因撞擊而松散,嚴(yán)重會(huì)導(dǎo)致調(diào)節(jié)刻度的旋鈕卡住
3.吸液及放液
垂直吸液
吸頭尖端浸入液面3mm以下,吸液前槍頭先在液體中預(yù)潤(rùn)洗
慢吸慢放
放液時(shí)如果量很小則應(yīng)吸頭尖端可靠容器內(nèi)壁
4.吸有液體的移液槍不應(yīng)平放,槍頭內(nèi)的液體很容易污染槍內(nèi)部而可能導(dǎo)致槍的彈簧生銹
5.移液槍在每次實(shí)驗(yàn)后應(yīng)將刻度調(diào)至最大,讓彈簧回復(fù)原型以延長(zhǎng)移液槍的使用壽命
補(bǔ)充:平常使用時(shí)容易忽視的一點(diǎn)揮發(fā)性的液體特別是濃鹽酸、三氟乙酸、醋酸等不要用移液槍吸該液體,避免揮發(fā)性物資腐蝕彈簧和橡膠墊。
揮發(fā)性的液體可以買帶濾芯的槍頭啊
另外,吸粘稠液體的時(shí)候一定要預(yù)潤(rùn)濕槍頭,這樣可以達(dá)到精確移液
或者是采用反向吸液的方法
四
移液器使用小常識(shí)
1.使用合適的吸頭:為確保更好的準(zhǔn)確性和精度,建議移液量在吸頭的35%-100%量程范圍內(nèi)。
2.吸頭的安裝: 對(duì)于大多數(shù)品牌的移液器,特別是多道移液器,安裝吸頭并非易事:為追求良好的密封性,需要將移液套柄插入吸頭后,左右轉(zhuǎn)動(dòng)或前后搖動(dòng)用力上緊。也有人會(huì)用移液器反復(fù)撞擊吸頭來(lái)上緊,但這樣操作會(huì)導(dǎo)致吸頭變形而影響精度,嚴(yán)重的則會(huì)損壞移液器,所以應(yīng)當(dāng)避免出現(xiàn)這樣的操作。RAININ(瑞寧)的多道移液器沒(méi)有O型環(huán),配合有前擋點(diǎn)的吸頭,只需輕壓一下即可達(dá)致理想密封,實(shí)在是多道移液器使用者的福音。
3. 吸頭浸入角度和深度: 吸頭浸入角度控制在傾斜20度之內(nèi),保持豎直為佳;吸頭浸入深度建議如下所示:
移液器規(guī)格 吸頭浸入深度
2µL和10 µL 1 mm
20µL和100 µL 2-3 mm
200µL和1000 µL 3-6 mm
5000 µL和10 mL 6-10 mm
對(duì)常溫樣品,吸頭潤(rùn)洗有助于提高準(zhǔn)確性;但是對(duì)于高溫或低溫樣品,吸頭潤(rùn)洗反而降低操作準(zhǔn)確性,請(qǐng)使用者特別注意。
5. 吸液速度: 移液操作應(yīng)保持平順、合適的吸液速度;過(guò)快的吸液速度容易造成樣品進(jìn)入套柄,帶來(lái)活塞和密封圈的損傷以及樣品的交叉污染。
建議:
1、移液時(shí)保持正確的姿勢(shì);不要時(shí)刻緊握移液器,使用帶指鉤的移液器幫助緩解手部疲勞;有可能的話經(jīng)常換手操作。
2、定期檢查移液器的密封狀況,一旦發(fā)現(xiàn)密封老化或出現(xiàn)漏液,須及時(shí)更換密封圈。
3、每年對(duì)移液器進(jìn)行1-2次校正(視使用頻率而定)。
4、絕大多數(shù)移液器,在使用前和使用一段時(shí)間后,要給活塞涂上一層潤(rùn)滑油以保持密封性。